Rakkude purustaja on tavaliselt kasutatav eksperimentaalne instrument, mida kasutatakse bioloogiliste rakkude purustamiseks ja rakusiseste ainete vabastamiseks.Rakkumurdja tööpõhimõte põhineb füüsikalise purustamise ja mehaanilise võnkumise põhimõttel ning raku purustamise eesmärk saavutatakse pakkudes piisavalt energiat rakkude struktuuri hävitamiseks.
Rakkude rikkuja tööpõhimõtet tutvustatakse üksikasjalikult allpool.Rakkude segaja põhikomponentide hulka kuuluvad kiiruse regulaator, purustuskamber, purustuspall ja proovitorustik jne. Nende hulgas kasutatakse kiirusregulaatorit purustuskambri pöörlemiskiiruse reguleerimiseks, mis on mahuti ladustamiseks. proovid ja purustamiskuulid ning purustamiskuulid purustavad rakud proovidega kokku põrgades.Enne rakuhävitaja kasutamist tuleks kõigepealt valida sobiv häiriv sööde.Tavaliselt kasutatavad purustamisvahendid on klaashelmed, metallhelmed ja kvartshelmed.
Peamised kaalutlused purustuskeskkonna valimisel on proovi laad ja purustamise eesmärk.Näiteks habraste rakkude puhul võib purustamiseks kasutada väiksemaid klaashelmeid;raskemate rakkude jaoks saab valida kõvemad metallist helmed.Purustusprotsessi ajal pange purustatav proov purustusanumasse ja lisage sobiv kogus purustusainet.Seejärel juhitakse purustuskambri pöörlemiskiirust kiiruse regulaatoriga, nii et purustusaine ja proov puutuvad pidevalt kokku.Need kokkupõrked võivad energia ülekandmise, rakumembraanide ja organellide lagunemise ning intratsellulaarsete materjalide vabastamise kaudu häirida raku struktuuri.
Rakkude purustaja tööprotsess hõlmab peamiselt järgmisi võtmetegureid: pöörlemiskiirus, purustuskeskkonna suurus ja tihedus, purustamise aeg ja temperatuur.Esimene on pöörlemiskiirus.Pöörlemiskiiruse valikut tuleb kohandada vastavalt erinevatele rakutüüpidele ja proovi omadustele.
Üldiselt saab pehmete elementide jaoks valida suurema pöörlemiskiiruse, et suurendada kokkupõrgete sagedust ja seeläbi rakke tõhusamalt häirida.Jäigamate elementide puhul, kuna need on vastupidavamad, saab proovi katkemise vähendamiseks tsentrifuugimise kiirust vähendada.
Teine on purustamisaine suurus ja tihedus.Purustuskeskkonna suurus ja tihedus mõjutavad otseselt purustamise efekti.Väiksemad häirivad kandjad võivad pakkuda rohkem põrkepunkte, muutes rakustruktuuride häirimise lihtsamaks.Suuremad purustusmaterjalid nõuavad pikemat purustamisaega.
Lisaks mõjutab kokkupõrke jõudu ka purustamisaine tihedus, liiga suur tihedus võib põhjustada proovi liigset killustumist.Katkestusaeg on raku katkemise oluline parameeter.Purustusaja valik tuleks määrata vastavalt proovi tüübile ja purustamisefektile.Tavaliselt, mida pikem on katkestusaeg, seda põhjalikumalt rakud rikutakse, kuid see võib kahjustada ka teisi proovi osi.Viimane on temperatuuri reguleerimine.Ei saa tähelepanuta jätta temperatuuri mõju rakkude killustatusele.Liiga kõrge temperatuur võib põhjustada rakkudes valkude ja nukleiinhapete denatureerumist, mõjutades seega killustumisefekti.Seetõttu on rakkude katkestamine soovitatav teostada krüogeensetes tingimustes, mida saab vähendada jahuti kasutamise või jääl töötamisega.
Rakkude hävitajatel on bioloogilistes uuringutes oluline roll.Parameetrite, nagu pöörlemiskiirus, purustuskeskkonna suurus ja tihedus, purustamisaeg ja temperatuur, mõistliku juhtimisega on võimalik saavutada rakkude tõhus purustamine.Pärast rakkude purunemist saab rakkudes saada erinevat tüüpi aineid, nagu valgud, nukleiinhapped, ensüümid jne, mis annavad olulise eelduse järgnevaks analüüsiks ja uurimiseks.Lühidalt öeldes on raku segaja oluline eksperimentaalne instrument ja selle tööpõhimõte põhineb füüsilise purunemise ja mehaanilise vibratsiooni põhimõttel.Rakkude tõhusat katkestamist saab saavutada erinevate parameetrite, nagu pöörlemiskiiruse, katkestuskeskkonna suurus ja tihedus, katkestusaeg ja temperatuur, juhtimisega.Rakkude hävitajat kasutatakse laialdaselt, pakkudes teadlastele mugavust ja tuge bioloogia valdkonna seotud teadusuuringutes.
Postitusaeg: 06. september 2023